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在使用REGIS手性柱時(shí),需要注意選擇合適的柱型號(hào)REGIS手性柱在液相色譜分析(HPLC)中扮演著至關(guān)重要的角色,專為解決手性化合物的對(duì)映異構(gòu)體分離問(wèn)題而設(shè)計(jì),是由具有光學(xué)活性的單體固定在硅膠或其它聚合物上制成的手性固定相。這種固定相能夠引入手性環(huán)境,使得對(duì)映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而實(shí)現(xiàn)光學(xué)異構(gòu)體的有效拆分。 REGIS手性柱是用于分離手性化合物的色譜柱,其測(cè)定步驟如下: 1.選擇合適的:根據(jù)待分離的手性化合物的性質(zhì)和結(jié)構(gòu),選擇適合的手性固定相。例如,對(duì)于酸性或堿性化合物,可以選擇具有相應(yīng)官能團(tuán)的手性固定相。 2.準(zhǔn)備流動(dòng)相:根據(jù)要求和待分離化合物的性質(zhì),選擇合適的溶劑作為流動(dòng)相,并加入適量的改性劑(如酸、堿、鹽等)以改善分離效果。同時(shí),確保流動(dòng)相的純度和穩(wěn)定性。 3.安裝:將正確連接到液相色譜儀上,注意避免柱子受到物理?yè)p傷和化學(xué)污染。在連接過(guò)程中,要確保柱子兩端的接頭緊密連接,防止漏液。 4.平衡:用流動(dòng)相沖洗一段時(shí)間,直至基線穩(wěn)定。這一步驟是為了去除柱子中的雜質(zhì)和殘留物,并使固定相充分浸潤(rùn)和活化。 5.注入樣品:將待分離的手性化合物樣品通過(guò)進(jìn)樣器注入到液相色譜儀中,并開始進(jìn)行分離分析。在注入樣品前,要確保樣品溶液的濃度適中,避免過(guò)載或欠載。 6.檢測(cè)與記錄:使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)器(如紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等)對(duì)手性化合物的分離情況進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),并記錄色譜圖和相關(guān)數(shù)據(jù)。根據(jù)色譜圖可以判斷手性化合物的分離效果和純度。 在使用REGIS手性柱時(shí),需要注意選擇合適的柱型號(hào)、流動(dòng)相和操作條件等參數(shù)。同時(shí),還需要注意柱子的維護(hù)和保養(yǎng),以確保其長(zhǎng)期穩(wěn)定的性能和延長(zhǎng)使用壽命。 |